Bioconjugação de nanopartículas de ouro em peptídeos sintéticos baseados em sequências imunogênicas de NS1 oriundas dos vírus Dengue tipo I, II, III, e IV

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dc.contributor.advisorGuimarães, Marco Cesar Cunegundes
dc.contributor.refereeSilva, André Romero da
dc.contributor.refereeNogueira, Breno Valentim
dc.date.accessioned2018-08-01T21:35:02Z
dc.date.available2018-08-01
dc.date.available2018-08-01T21:35:02Z
dc.identifier.urihttp://repositorio.ufes.br/handle/10/7111
dc.publisherUniversidade Federal do Espírito Santopor
dc.publisher.countryBRpor
dc.publisher.courseMestrado em Biotecnologiapor
dc.publisher.initialsUFESpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologiapor
dc.subjectNanopartículas de ouropor
dc.subjectPeptídeos sintéticospor
dc.subjectBioconjugaçãopor
dc.subjectGold nanoparticleseng
dc.subjectSynthetic peptideseng
dc.subjectBioconjugationeng
dc.subject.br-rjbnImunoglobulinaspor
dc.subject.br-rjbnNanopartículaspor
dc.subject.br-rjbnBiotecnologiapor
dc.subject.cnpqBiotecnologiapor
dc.subject.udc61
dc.titleBioconjugação de nanopartículas de ouro em peptídeos sintéticos baseados em sequências imunogênicas de NS1 oriundas dos vírus Dengue tipo I, II, III, e IVpor
dc.typemasterThesiseng
dcterms.abstractRecentemente, nanocarreadores constituídos de peptídeos sintéticos conjugados com nanopartículas de ouro (AuNP) têm sido considerados uma plataforma eficiente para a entrega de imunógenos e consequente produção de anticorpos. Apesar de as nanovacinas metálicas superarem problemas decorrentes da vacinação tradicional com patógenos vivos atenuados ou patógenos inativados, a aplicação e a estabilidade das nanobiointerfaces em sistemas biológicos continuam sendo uma lacuna questionável que se relaciona com o método de conjugação. Este trabalho descreve a bioconjugação via atração eletrostática e ligação covalente de peptídeos imunogênicos na superfície de nanoesferas de ouro e avalia sua estabilidade em uma ampla gama de concentrações de sal e pH. O software Protean® foi usado para predizer as sequências imunogênicas na proteína não estrutural 1 (NS1) dos 04 sorotipos do vírus da dengue (DENV), que foram sintetizado em fase sólida e caracterizado com HPLC e ICP-MS. Técnicas como UV-vis, Fluorimetria, FTIR, Raman, Potencial Zeta e DLS, bem como TEM foram empregadas para caracterizar ambas as abordagens eletrostática e covalente antes e depois da bioconjugação. A interação entre o peptídeo derivado de DENV1 NS1 com AuNP demonstrou melhor eficiência no processo de ligação e na estabilidade do nanbiomaterial conjugado para ambas as abordagens. Logo, esses dados abrem novas perspectivas para o uso de nanobioconjugados com peptídeos imunogênicos como plataformas para entrega de fármacos / imunógenos.por
dcterms.abstractRecently, nanocarriers made of synthetic peptides conjugated with gold nanoparticles (AuNP) has been considered an efficient platform for immunogen delivery and production of antibodies. Although metal nanovaccines surpass issues arising from traditional vaccination with live attenuated pathogens or inactivated pathogens, the application and stability of nanobiointerfaces in biological systems remains a questionable gap related to the method for conjugation. This work describes bioconjugation via electrostatic attraction and covalent bound of immunogenic peptides on the surface of gold nanosphere and evaluates their stability in a large range of salt concentrations and pH. Protean® software predicted the immunogenic sequences in non-structural protein 1 (NS1) from the 04 dengue virus (DENV) serotypes, then synthesized in solid phase and characterized with HPLC and ICP-MS. Techniques such as UV-vis, Fluorimetry, FTIR, Raman, Zeta Potential and DLS, as well as TEM were employed to characterize both electrostatic and covalent approaches before and after bioconjugation. The interaction between peptide derived from DENV1 NS1 with AuNP demonstrated better efficiency in the connection process and in the stability of the conjugated nanbiomaterial for both approaches. Therefore, these data open new perspectives for the use of nanobioconjugates with immunogenic peptides as platforms for drug / immunogen delivery.eng
dcterms.creatorCosta, Danilo Soares
dcterms.formattexteng
dcterms.issued2017-08-31
dcterms.languageporeng
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